近日,磁共振中心李从刚研究团队,以高灵敏的19F化学标记方法,结合电穿孔递送技术,实现了人源细胞内6-40 kD的结构蛋白观测,其检测浓度低至1.0 μM,接近了部分蛋白质的生理浓度。相关研究成果发表于《德国应用化学》(Angew. Chem. Int. Ed.)。
除了较高的灵敏度,wPSP-6F探针同时具有较好的蛋白质构象分辨能力。以GB1突变体的二聚作用为例,19F信号可以在稀溶液或细胞内很好地区分其单体和二聚构象。实验结果表明细胞拥挤复杂的环境会极大地促进蛋白的二聚,其二聚解离常数减小30倍,其中细胞内非特异弱相互作用非常关键。
蛋白质的功能往往受到复杂细胞环境的调控,并在不同类型的细胞中表现出差异。本工作所建立的高效19F标记方法将拓展活细胞核磁共振的应用场景和范围,有望在人源细胞中近生理浓度下研究蛋白质生物学功能和筛选相关药物。
文章的第一作者是精密测量院副研究员柴兆斐和博士后吴琼,通讯作者是研究员李从刚。
该研究工作得到了国家自然科学基金和科技部重点研发计划的资助。
论文链接:https://doi.org/10.1002/anie.202300318